溶菌酶溶液(10mg/ml)
● 產(chǎn)品規格:
10 ml
● 產(chǎn)品內容:
名稱(chēng)
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貨號
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規格
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貯存溫度
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運輸溫度
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溶菌酶 (干粉)
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LS004-01
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100 mg
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-20℃
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常溫
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溶菌酶溶解液
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LS004-02
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10 ml
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-20℃
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常溫
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● 保存條件:
未配制的溶菌酶干粉和溶解液-20℃保存,有效期24個(gè)月;配制好的溶液-20℃貯存有效期12個(gè)月。
● 產(chǎn)品說(shuō)明:
Lysozyme,中文名為溶菌酶,EC Number:3.2.1.17,CAS:
12650-88-3,活性>20KU/mg,純化自蛋清(egg white),不含DNase、RNase和Protease,可以用于以質(zhì)粒抽提、蛋白純化等為目的的細菌裂解。
● 溶液配制方法:
取10
ml溶解液加到溶菌酶干粉中,徹底溶解,即配成10
ml(10mg/ml)的溶菌酶溶液,-20℃保存。
● 使用方法:
細菌裂解:
1.
細菌過(guò)夜培養菌液10 ml 12,000 rpm離心 5 min 后,棄上清,盡量棄除殘余培養基,留取管底部菌體。
2.
加入1 ml細菌裂解液,50μl
10mg/ml 溶菌酶溶液,用吸頭吹打至無(wú)可見(jiàn)細胞團塊,重懸菌體。
注:此步驟可加入蛋白酶抑制劑如PMSF,保護蛋白,抑制降解;如裂解液比較粘稠,可以加入DNaseI溶液,消化基因組DNA。
3.
37℃孵育20 min,期間輕彈離心管數次以加速裂解。
注:溶菌酶的用量和處理時(shí)間與處理的細菌種類(lèi)密切相關(guān),用戶(hù)可以根據細菌種類(lèi)進(jìn)行調節。如革蘭氏陽(yáng)性菌應將處理時(shí)間延長(cháng)到30-60分鐘。
4.
裂解完成后 13,000rpm4℃離心5
min,將上清(上清中即為可溶性蛋白)轉移至新的離心管中,直接進(jìn)行下一步純化或檢測實(shí)驗。