首頁(yè) > 蛋白生物學(xué) > 相關(guān)溶液 > 蛋白電泳緩沖液
1×SDS-PAGE快速電泳緩沖液(變性電泳,粉末型)
● 產(chǎn)品組成:
貨號 |
名稱(chēng) |
規格 |
TG190P |
1×SDS-PAGE快速電泳緩沖液(變性電泳,粉末型) |
10×1L |
|
說(shuō)明書(shū) |
一份 |
● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品為即用型SDS-PAGE快速電泳緩沖液(Fast Running Buffer for SDS-PAGE),由Tris-Glycine電泳緩沖液優(yōu)化而來(lái),適用于Tris-Glycine體系(Laemmli體系)蛋白凝膠電泳。與傳統的Tris-Glycine電泳緩沖液相比,使用本產(chǎn)品電泳時(shí)無(wú)需根據分離膠和濃縮膠調整不同電壓,可全程200-250 V恒壓電泳,約20-35 min可完成電泳,大大節約時(shí)間,并且對小分子蛋白分離效果更好,可使預染蛋白Marker中10 kD與15 kD條帶分離并清晰可見(jiàn)(凝膠濃度8%以上),達到快速高效分離蛋白的作用。
本產(chǎn)品為預混粉末,使用前需要用水配制溶解,但無(wú)需調節pH值,pH 8.0-8.5。
● 貯存和效期:
常溫貯存,常溫運輸,有效期2年;配成溶液后,4℃貯存,有效期1-2周。
● 用前必讀:
1. 和傳統的SDS-PAGE電泳液(Laemmli系統,1×Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液,25 mM Tris,192 mM Glycine,0.1% SDS,pH8.3)相比,本快速電泳液可以大幅加快電泳速度,縮短電泳時(shí)間。推薦150-200V恒壓電泳,通常20-35分鐘就能完成電泳。
2. 使用快速電泳緩沖液?jiǎn)伟迥z電泳時(shí),穩壓200 V,起始電流在60-70 mA,如果同時(shí)電泳2板膠或者4板膠,電流會(huì )升高,請根據需求采取降溫措施。
3. 對于低濃度例如6%、8%或10%的固定濃度膠,本快速電泳液比傳統電泳液具有更好的分離效果,可以達到類(lèi)似梯度膠的分離效果,更適合小分子量蛋白電泳。產(chǎn)生相同分離效果時(shí),使用本快速電泳液可使用濃度更低的分離膠,例如使用傳統電泳液對10%、12%或15%分離膠進(jìn)行電泳時(shí),使用本快速電泳液時(shí)對應的分離膠只需要分別為6%、8%和10%,電泳效果基本一致。并且由于膠濃度較低,可以增強轉膜效率,提高WB檢測靈敏度。
不同蛋白大小選擇不同的分離膠濃度,參考下表:
Laemmli系統 SDS-PAGE分離膠濃度 |
最佳分離范圍(kD) 1×SDS-PAGE快速電泳緩沖液 |
最佳分離范圍(kD) 1×Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液 |
6% |
25-300 |
50-350 |
8% |
10-250 |
35-300 |
10% |
5-150 |
20-150 |
12% |
3-100 |
15-100 |
15% |
低于60 |
10-80 |
4. 本快速電泳液含有SDS,適用于變性膠蛋白電泳,不適用于非變性電泳(Native-PAGE)。
5. 該快速電泳緩沖液建議用于經(jīng)典Laemmli系統配制的凝膠,經(jīng)測試可以達到最優(yōu)的分離效果。對于其他電泳系統如Bis-Tris系統,HEPES系統,Tris-醋酸系統,Tricine系統等,需要經(jīng)過(guò)驗證測試后使用。
6. 本快速電泳液可以適當回收,回收后的電泳液可以作為外槽電泳液再使用1-2次。如果希望獲得最佳的電泳效果,請勿使用回收的電泳液。內槽緩沖液每次都需要使用新鮮配制的電泳緩沖液。
● 使用說(shuō)明:
1. 即用型1×SDS-PAGE快速電泳緩沖液配制:
取1 L包裝的SDS-PAGE快速電泳液(粉末裝),倒入到燒杯中,加入超純水至總體積約為900 ml,漩渦攪拌溶解,定容到1 L并混勻,即配成即用型1×SDS-PAGE快速電泳液,溶液型緩沖液建議4℃貯存,可保存1-2周。
注:配制好的電泳液放置時(shí)間不宜超過(guò)兩周。如果出現變色或沉淀請重新配制新鮮的電泳液。
2. 電泳條件:
電壓建議為150-200V。一般情況下,恒壓200 V電泳時(shí),對于濃度為10%的分離膠僅需20-25分鐘即可完成電泳。如果需獲得更加平整和銳利的條帶,可以把電壓調整為100-150V,此時(shí)電泳時(shí)間需要適當延長(cháng)。
● 實(shí)驗示例:
|