氨芐青霉素溶液(100 mg/ml)

● 產(chǎn)品包裝：

● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

氨芐青霉素(Ampicillin, Amp)又稱(chēng)安比西林、氨芐西林，是一種β-內酰胺類(lèi)抗生素,干擾肽聚糖的交聯(lián)從而抑制細菌細胞壁的合成。氨芐青霉素時(shí)常被用于分子生物學(xué)實(shí)驗研究中，如用于配制含氨芐青霉素的LB培養基或LB平板等。氨芐青霉素溶液已經(jīng)0.22 μm過(guò)濾除菌，可以直接添加到培養基中。一般推薦工作濃度為50～100 μg/ml。

本氨芐青霉素溶液已經(jīng)優(yōu)化溶解液，可以保持溶液在-20℃下基本不結冰，方便使用的同時(shí)降低了反復凍融對抗性的影響。

● 貯存、效期及運輸：

-20℃保存；有效期6個(gè)月；濕冰運輸。

● 使用方法：

1. 取出-20℃保存的氨芐青霉素溶液，常溫徹底溶化，完全混勻。

注：溶液在-20℃下基本為流動(dòng)性溶液，如有冰晶形成，常溫徹底溶化后使用。

2.一般Amp在LB中終濃度為50～100 μg/ml?？梢源篌w按照1/1000 LB體積加入100 mg/ml Amp溶液，如100 ml LB中加入50-100 μl Amp 100 mg/ml。

注：氨芐青霉素對高溫敏感，要等待LB瓊脂溫度低于55℃后再加入氨芐溶液。

  3. 在所有的細菌篩選抗生素中，氨芐青霉素的穩定性最為不佳，參照下表確定使用的效期：

● 注意事項：

1. 衛星菌落：LB氨芐瓊脂平板培養時(shí)間過(guò)長(cháng)時(shí)，會(huì )發(fā)現一個(gè)大菌落的周?chē)鷷?huì )出現一些小的菌落，這些小的菌落稱(chēng)為衛星菌落（satellite colony）。原因：氨芐青霉素可以被β-內酰胺酶（β-lactamase）水解。平板上的細菌產(chǎn)生的β-內酰胺酶分泌到細胞外，隨著(zhù)細菌的生長(cháng)，培養基中的β-內酰胺酶會(huì )不斷增加，這時(shí)培養基內氨芐青霉素會(huì )被降解，因此沒(méi)有氨芐抗性質(zhì)粒的小菌群則環(huán)繞大菌落生長(cháng)，產(chǎn)生衛星菌落。衛星菌落沒(méi)有氨芐抗性，挑取單菌落時(shí)，不要挑取衛星菌落培養。

2. 質(zhì)粒丟失：氨芐抗性細菌在傳代的時(shí)候，會(huì )出現質(zhì)粒丟失，傳代次數越多，質(zhì)粒丟失的可能性越大。對于其他抗生素如氯霉素，細菌如果丟失了部分帶抗性的質(zhì)粒，該菌在含有氯霉素的培養基中是不會(huì )生長(cháng)的。但是對于氨芐則不然，在液體培養液中，培養時(shí)間過(guò)長(cháng)的培養基中氨芐的濃度會(huì )降低，丟失了一部分質(zhì)粒的細菌也可以在其中生長(cháng)。因此對于使用氨芐作為抗性標記的克隆，每隔一段時(shí)間需要檢查細菌質(zhì)粒丟失情況。比較直觀(guān)的辦法就是通過(guò)SDS-PAGE，如果發(fā)現蛋白質(zhì)的表達水平降低了，很大可能是因為質(zhì)粒丟失了，此時(shí)需要重新轉化重組載體。

3. 不要使用配制時(shí)間過(guò)長(cháng)或超過(guò)效期的氨芐溶液。氨芐存儲時(shí)間過(guò)長(cháng)或者保存不當，很有可能發(fā)生降解。

4. 液體培養建議：在液體培養中，不要讓細菌長(cháng)到過(guò)飽和，在LB培養基中，OD₆₀₀絕對不能超過(guò)3。如果是擴大培養，可以先把初始培養液內細菌沉淀，然后利用新鮮的培養液重懸，再進(jìn)行下一步的培養，這樣可以大大減少β-內酰胺酶在液體中的含量。