Anti-COX
IV抗體(鼠單抗)
Anti-COX IV Antibody(Monoclonal Antibody from Mouse)
產(chǎn)品編號
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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RGC2030
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Anti-COX IV抗體(鼠單抗)
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20 μl
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● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
來(lái)源
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用途及稀釋比例
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抗體類(lèi)型
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COX IV分子量
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Mouse
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WB 1:5000-10000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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單克隆抗體
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~17 kD
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注:WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF,
Immunofluorescence
COX IV抗體用經(jīng)過(guò)適當修飾的人工合成COX IV一段多肽作為抗原制備而成的抗COX IV小鼠單克隆抗體。本抗體在Western blot或免疫染色時(shí)僅識別COX IV。COX IV抗體可用作線(xiàn)粒體蛋白上樣量的內參。
真核細胞中的細胞色素C氧化酶(Cytochrome C Oxidase,簡(jiǎn)稱(chēng)COX)是一種異源寡聚酶,通常含有13個(gè)亞基,定位于線(xiàn)粒體內膜,是線(xiàn)粒體呼吸鏈的酶復合物,它可以從每4個(gè)還原性的細胞色素C得到一個(gè)電子,傳遞給一個(gè)氧分子,最終把一個(gè)氧分子轉變成兩個(gè)水分子。在此過(guò)程中細胞色素C氧化酶會(huì )結合4個(gè)質(zhì)子用于產(chǎn)生2個(gè)水分子,同時(shí)把4個(gè)質(zhì)子轉移到膜的另外一側產(chǎn)生質(zhì)子梯度,即建立跨膜的電化學(xué)勢,隨后ATP合成酶可以利于該電化學(xué)勢合成ATP。細胞色素C氧化酶中構成催化中心的3個(gè)最大的亞基由線(xiàn)粒體DNA編碼,其余10個(gè)亞基包括COX IV由細胞核內的基因組DNA編碼。細胞色素C氧化酶活性缺陷和人類(lèi)多種疾病相關(guān)。
本抗體如果用于常規的Western檢測,至少可以檢測20次。
● 貯存形式:
1 mg/ml抗體溶于PBS,50%甘油,pH7.2。
● 保存及運輸條件:
-20℃保存,一年有效;避免反復凍融;濕冰運輸。
● 使用說(shuō)明:
1. Western Blot雜交(ECL顯色):1:1000-5000稀釋?zhuān)胤跤?-2 h或4℃過(guò)夜。
2. 免疫熒光(IF)和免疫組化(IHC):1:200-1000稀釋。
● 實(shí)驗示例:
K562懸浮細胞膜蛋白檢測
樣品:TP為RIPA提取總蛋白做對照;CY為膜蛋白提取上清-胞漿蛋白;M為使用不同去垢劑提取的膜蛋白
電泳:4-18% RealPAGE PrecastGel,樣品使用5×速溶性上樣緩沖液配成0.5μg/μl,37度30min后上樣,上樣體積為10μl和20μl,
轉膜:0.45μm PVDF膜,1×RealBlot濕轉 400mA 35min。
封閉:快速封閉液 RT 10 min
一抗:ATPase兔單抗 1:5000 O/N;
GAPDH兔多抗 1:3000 O/N;
COX
IV鼠單抗 1:5000
O/N。
二抗:羊抗鼠IgG-HRP(貨號:HGM1060) 1:5000 RT
60min;羊抗兔IgG-HRP(貨號:HGM1020) 1:5000 RT 60min;
檢測:RealECL發(fā)光液(貨號:EC2520)自動(dòng)曝光1秒
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