植物凝膠(Phytagel)
●產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Phytagel又名Gellan gum,Gelrite。是一種瓊脂的替代物,是細菌(假單孢菌Pseudomonas elodea)經(jīng)過(guò)發(fā)酵生產(chǎn)的,含有葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖等物質(zhì),具有無(wú)色、透亮和高韌性的特點(diǎn),是配制植物組織培養基和微生物培養基的主要成分。由于其克服了傳統瓊脂在植物組織培養中的固有缺陷為植物學(xué)研究帶來(lái)了一場(chǎng)新的革命,已經(jīng)成為了國際公認的植物組培首選產(chǎn)品。
●常用工作濃度:
植物培養基中1.5-2.5g/L;微生物培養基中10g/L。
●優(yōu)點(diǎn):
1. 高透明度:It offers clear solid medium after gelling due to a higher clarity than agar allowing easy observation inside the medium.
2. 用量更少:A smaller amount of gellan gum offers gel strength equal to agar.
3. 促進(jìn)生長(cháng):It can accelerate growth rate of plant bodies.
●使用注意事項:
1. 植物凝膠不易溶解于冷水中,滅菌前請搖勻。
2. 植物凝膠的凝固程度主要與三個(gè)因素有關(guān):
a 離子強度:Phytagel的凝固需要陽(yáng)離子尤其是二價(jià)陽(yáng)離子的存在。一般植物培養基中的鈣離子和鎂離子的濃度足以讓phytagel凝固。微生物學(xué)研究所用的低鹽培養基中為了使Phytagel凝固,通常需要另外加入鈣鹽、鎂鹽或使用高濃度的Phytagel。
b 培養基的pH值:pH5.8是其凝固的最適pH值,pH低于5.8不易凝固。由于高壓滅菌會(huì )使培養基的pH降低0.3-0.5單位,因此滅菌前培養基的pH值要用MES和KOH調節到pH5.8,由于MES的緩沖能力,滅菌后不會(huì )使pH降低。建議MES 1升培養基中加0.5克(終濃度為2.5 mM)
注:培養基中加入植物凝膠后,用KOH調節pH到5.8。避免先調節pH后加植物凝膠,因為植物凝膠會(huì )影響培養基的pH。
c 凝膠用量:一般說(shuō)來(lái),對大多數植物培養基來(lái)說(shuō),1升培養基中凝膠用量3g(0.3%)足矣。特殊要求請適當調整凝膠用量。
附錄:植物凝膠與瓊脂使用對比
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[Ca2+]
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[Mg2+]
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Phytagel
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Agar
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pH
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MS培養基
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2.99mM
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1.50mM
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0.3%
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1%
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5.8
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1/2 MS培養基
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1.495mM
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0.75mM
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0.6%
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1%
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5.8
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細菌培養
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-
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-
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1%
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1.5%
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-
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Reference:
1 Genes involved in cytokinin signal transduction. Kakimoto T. J. Plant. Res. 1998,Vol. 111, 2,261-265.